分光光度計是基于物質對不同波長單色光的選擇性吸收定律(朗伯 - 比爾定律),完成樣品定性鑒別與定量濃度檢測的精密分析儀器,是理化實驗室的基礎核心設備,廣泛應用于環(huán)境監(jiān)測、食品、醫(yī)藥、化工、高??蒲械阮I域。
光源發(fā)出連續(xù)光譜,經過單色器色散,分出特定波長的單色光;單色光穿過裝有待測樣品的比色皿,樣品溶液會吸收特定波段的光;光電檢測器接收透射后的光信號,將光信號轉為電信號,經過放大運算,最終換算出樣品的吸光度、透光率,以此計算樣品內目標物質含量。
朗伯 - 比爾定律公式:A=εbc A 為吸光度,ε 是摩爾吸光系數,b 是光程長度,c 代表待測物質濃度。在固定波長、溫度條件下,吸光度和樣品濃度呈線性關系,這就是分光光度法定量檢測的理論基礎。
光源 可見波段一般采用鎢燈;紫外波段使用氘燈。鎢燈適用 340~1000nm 可見光范圍,氘燈覆蓋 200~400nm 紫外區(qū)。基礎可見分光光度計僅配置鎢燈;紫外可見一體機同時搭載氘燈 + 鎢燈,實現紫外、可見光全波段檢測。
上海析譜儀器有限公司的721 型可見分光光度計采用鎢燈光源,滿足可見光區(qū)間常規(guī)比色檢測;752 型紫外可見分光光度計雙光源配置,覆蓋 200-1000nm 全波段,兼顧紫外與可見光檢測需求。
單色器 單色器由狹縫、棱鏡 / 光柵組成,作用把復合光拆解成單色光。光柵型單色器波長分辨率更高,波長誤差更小,也是目前實驗室主流配置。
樣品池(比色皿) 玻璃比色皿僅適用于可見光檢測,紫外線會被玻璃吸收;紫外波段檢測必須使用石英比色皿。不同光程 1cm、2cm、5cm 規(guī)格,光程越長檢測靈敏度越高。
檢測器 光電管、光電倍增管是常見檢測器,負責采集光信號,決定儀器檢測靈敏度與噪聲水平。
波長范圍:區(qū)分可見機型、紫外可見一體機最重要指標
波長準確度:波長的實測值與理論值偏差,數值越小,儀器精度越高
光譜帶寬:影響分辨率,帶寬越小,分辨能力越強
重復性:多次測同一樣品,吸光度數值波動,反映儀器穩(wěn)定性
基礎教學、常規(guī)水質比色項目,僅可見光檢測,選用可見分光光度計即可;如果需要檢測有機物、藥物、重金屬,涉及紫外波段測試,則需要紫外可見分光光度計。
開機后需要充分預熱,光源達到穩(wěn)定狀態(tài)再做校準測試。
比色皿外壁液體必須擦拭干凈,禁止用手觸碰透光面,避免劃痕、油污影響檢測。
每次更換檢測波長,建議重新做空白基線校準,消除系統(tǒng)誤差。
儀器需要放置避光、干燥、無腐蝕性氣體的實驗環(huán)境,減少光學元件老化。
掌握分光光度計基礎原理與參數含義,才能匹配實驗需求挑選合適設備。上海析譜儀器有限公司分光光度計系列產品,經過完整出廠校準,適配高校、企業(yè)、檢測機構常規(guī)光譜分析實驗。